博奥晶典高分辨率空间转录组平台
博奥晶典高分辨率空间转录组使用原位捕获和条形码技术,在亚细胞分辨率(探针簇直径0.8 μm,相邻簇中心距离1.4 μm)下获取整个冷冻组织切片中的转录组图谱,可以在单细胞分辨率水平上研究细胞间的相互作用。目前,该产品兼容冰冻组织(OCT 包埋FF 组织),适用于所有动植物样本。
1、 表达芯片特征
图1 博奥晶典高分辨率空间表达芯片示意图
芯片包括两种类型:组织透化芯片和基因表达芯片,表达芯片捕获区域面积为11*11mm。在捕获区域内存在着数千万的探针簇,每个探针簇的直径为0.8 μm,每平方微米有约18000 条探针,用于捕获转录本(图1)。每条探针捕获序列由5 部分组成 :
1、P7 和Seq primer:部分测序引物序列;
2、空间Barcode 序列;
3、固定序列:57 nt;
4、UMI 序列;
5、30nt poly(dT) 序列用于捕获转录本;
2、 表达芯片特征
图 2 博奥晶典高分辨率空间转录组实验流程
由于不同物种、组织来源的样本所需的最佳透化时间不尽相同,在空间转录组测序实验前,首先要进行组织优化。确定好透化条件后,即可进行空间转录组文库构建及测序分析流程。
3、 送样要求
可以参考《博奥晶典10x FF 冰冻组织空间转录组样品制备及运输指南》进行样本制备及送样;要求 RNA 的 RIN 值大于7 的样本用于正式实验。
4、 数据表现
图3 小鼠肾组织空间转录分群映射图
使用博奥晶典高分辨率空间转录组平台, 构建了小鼠肾的高分辨率空间转录组图谱,揭示了肾组织空间分区结构(图3)。其次,小鼠肾基因表达图谱与HE 染色结果相结合可以清晰的了解各细胞类群的基因表达及相互作用,揭示它们对疾病发生、发展、治疗、预后评估的价值。
图4 小鼠肾组织空间转录分群映射图
目前对人和小鼠的多种组织,包括嗅球、小肠、肾脏、肝等进行空间转录实验,绘制各种细胞类型在组织中的精细空间分布(图4)。
5、 平台优势
亚细胞分辨率:分辨率为1.4 μm,提供高精度的亚细胞空间定位;
单细胞时空组学完整解决方案:结合病理空间信息和单细胞分辨率,与单细胞和Xenium亚细胞空间原位平台联合,从单细胞、空间以及原位高精度解析组织生物学特征;
高捕获效率及高通量基因检测:超高密度探针,实现切片组织上捕获更多的转录本信息,对于新转录本和低表达丰度的检测提供优势;
多分辨率分析:支持5-100 μm 分辨率数据分析;